
miR-199b-3p与CRIM1在胃癌细胞中的靶向关系及其功能
背景与目的 研究发现,miR-199b-3p在胃癌组织中表达下调,而半胱氨酸丰富跨膜BMP调节因子1(CRIM1)在胃癌组织中表达上调。目前miR-199b-3p在胃癌细胞生物学行为中的作用机制尚未明确,其与CRIM1之间是否有关联也不清楚。因此,本研究探讨是否miR-199b-3p与CRIM1存在相互作用以及对胃癌细胞功能的影响。方法 采用qRT-PCR与免疫组化方法检测胃癌组织与癌旁组织中miR-199b-3p和CRIM1的表达。以胃癌MGC803细胞为研究对象,观察过表达miR-199b-3p(miR-199b-3p模拟物)与敲低CRIM1(si-CRIM1)后,细胞增殖能力、侵袭/迁移能力以及凋亡率的变化;应用生物信息学方法预测和双荧光素酶报告基因实验分析miR-199b-3p和CRIM1的靶向关系,并用Western blot方法验证。结果 qRT-PCR结果显示,与癌旁组织比较,胃癌组织中miR-199b-3p表达水平降低,而CRIM1增加(均P<0.05);免疫组化实验结果显示,CRIM1在癌组织中呈阳性表达,在癌旁组织呈阴性表达。过表达miR-199b-3p或敲低CRIM1后,MGC803细胞的增殖与侵袭/迁移能力降低,凋亡率增加(均P<0.05)。生物信息学方法预测和双荧光素酶报告基因实验显示miR-199b-3p与CRIM1存在靶向关系;Western blot实验结果表明,转染miR-199b-3p模拟物后,CRIM1表达降低(P<0.05)。结论 CRIM1是miR-199b-3p的靶基因,miR-199b-3p能够通过靶向调控CRIM1的活性进而抑制胃癌细胞的增殖、侵袭、迁移,并促进胃癌细胞凋亡,miR-199b-3p/CRIM1通路可作为胃癌治疗的潜在靶点进一步研究。