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清瘟解热方对湿热证型病毒性肺炎大鼠肺损伤及CCL3/CCR5信号通路的作用

实验研究

清瘟解热方对湿热证型病毒性肺炎大鼠肺损伤及CCL3/CCR5信号通路的作用

琳曼
庭瑞
伟波
湖南中医药大学学报第44卷, 第11期pp.1951-1958纸质出版 2024-11-28
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目的 探讨清瘟解热方(以下简称QWJR)对湿热证型病毒性肺炎大鼠肺损伤及CCL3/CCR5信号通路的作用。方法 将48只大鼠随机分为正常组、湿热模型组、阳性药物组(甲泼尼龙)、清瘟解热低剂量组(QWJR-L)、清瘟解热中剂量组(QWJR-M)、清瘟解热高剂量组(QWJR-H),每组8只,雌雄各半,正常组自然环境饲养,其余各组湿热外因+内因饲养14 d。14 d后,除正常组气管注射50 μL PBS外,其余组均运用Poly(I:C)气管注射,建立湿热证型病毒性肺炎大鼠模型。造模2 h后,正常组和湿热模型组灌胃生理盐水,其余各组给予相应药物干预,连续给药3 d。收集样本后检测相关指标。(1)湿热证评价指标:大鼠症状、证候积分、体质量、血清总胆固醇(cholesterol, CHOL)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C)含量、血常规;(2)肺泡毛细血管屏障变化、肺损伤情况:肺组织的干湿比、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)总细胞计数、BALF总蛋白浓度、HE染色观察大鼠肺组织病理变化;(3)趋化因子CCL3(CC chemokine Ligand 3, CCL3)/CC趋化因子受体-5(CC chemokine receptor 5, CCR5)通路及下游因子:qPCR法检测肺组织中CCL3、CCR5、磷脂酶C(phospholipase C, PLC)、蛋白激酶C(proteinkinase C, PKC)mRNA表达水平和Western-Blot法检测CCL3、CCR5、PLC、PKC蛋白表达水平。结果 QWJR干预后大鼠大便黏滞或溏泄伴臭秽,肛门红肿污秽情况有所减轻,大鼠湿热证候积分降低,血脂CHOL、LDL-C水平降低(P<0.05);血常规中WBC及NE水平较模型组降低(P<0.05);QWJR-M组和QWJR-H组肺组织W/D值、BULF中总蛋白含量、总细胞数均降低,且以高剂量组治疗效果最显著(P<0.01),并有效改善大鼠肺组织病理损伤;与模型组相比,阳性药物组、QWJR-H组大鼠CCR5、PLC、PKC蛋白表达水平降低(P<0.05,P<0.01),CCL3、CCR5、PLC、PKC mRNA表达量降低(P<0.05,P<0.01)。结论 QWJR可减轻湿热大鼠湿热症状,改善湿热证型病毒性肺炎大鼠肺部损伤情况,该作用可能是通过抑制CCL3/CCR5信号通路实现的。

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