
三黄四物汤不同溶剂提取物的抗炎作用研究
目的 探索三黄四物汤(SST)不同溶剂提取物的体外抗炎作用及其相关机制,分析其主要成分与抗炎作用的关系,并探索其体内抗炎作用。方法 通过制备三黄四物汤水提物(SSTW)及乙醇提取物(95%乙醇提取物SSTE、50%乙醇提取物SSTWE);采用高效液相色谱法(HPLC)分析其主要成分;通过LPS诱导RAW264.7细胞建立炎症模型,并采用苯酚胶浆法建立大鼠慢性盆腔炎(chronic pelvic inflammatory disease, CPID)模型;使用MTT法检测细胞存活率,Griess法检测NO水平,ELISA法检测PGE2、IL-6、TNF-α水平,Western blot法检测COX-2、iNOS及MAPKs通路、NF-κB通路相关蛋白表达水平,并通过病理切片观察大鼠子宫病理改变。结果 SSTWE 0.78-25 μg/mL组与正常组相比,细胞存活率无显著差异(P>0.05)。SSTWE 12.5 μg/mL抗炎作用弱于SSTE而类似于SSTW,SSTWE 25 μg/mL抗炎作用强于SSTW而类似于SSTE。SSTW、SSTE和SSTWE均明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS和COX-2蛋白表达(P<0.05);SSTWE明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞ERK磷酸化蛋白表达、IκB-α磷酸化蛋白表达及细胞核中p65蛋白表达,同时增加IκB-α总蛋白表达及细胞质中p65蛋白的表达水平(P<0.05)。SST明显抑制CPID大鼠血清TNF-α和IL-6含量(P<0.05),减轻盆腔局部组织粘连,改善子宫病理形态。结论 三黄四物汤有显著体外抗炎作用,其机制均与炎症通路MAPKs和NF-κB有关;其不同提取物抗炎作用及细胞毒性不同,可能与当归成分有关;SST对大鼠CPID有显著抗炎作用,可作为慢性盆腔炎的候选药物。