目的 本研究旨在评估蜂斗菜素对肝细胞癌细胞系2（hepatocellular carcinoma cell line 2, HepG2）的抗肿瘤活性，并探讨蜂斗菜素通过调控环状SET结构域蛋白1（circular RNA SET domain bifurcated histone lysine methyltransferase 1, circSETDB1）和微小RNA-345-5p（microRNA-345-5p, miR-345-5p）的mRNA表达对细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 将HepG2细胞分为多个处理组。对照组不做任何处理；蜂斗菜素处理包括蜂斗菜素L组（25 mol/L）、蜂斗菜素M组（50 mol/L）、蜂斗菜素H组（100 mol/L）、蜂斗菜素组（100 mol/L）；siRNA干扰包含环状SET结构域蛋白1小干扰RNA（small interfering RNA targeting circular SET domain bifurcated histone lysine methyltransferase 1，si-circSETDB1）组、小干扰RNA阴性对照（small interfering RNA negative control, si-NC）组；过表达环状SET结构域蛋白1过表达质粒（overexpression vector for circular SET domain bifurcated histone lysine methyltransferase 1, pcDNA-circSETDB1）组和蜂斗菜素+pcDNA-circSETDB1组。采用qRT-PCR检测肝癌组织及癌旁组织的circSETDB1和miR-345-5p的mRNA表达水平；CCK-8检测细胞增殖活性；流式细胞术检测细胞凋亡情况；Western blot检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3（cleaved cysteinyl aspartate-specific proteinase-3, Cleaved-Caspase-3）蛋白表达水平；克隆形成实验检测细胞集落形成；划痕实验和Transwell实验分别检测细胞愈合率和迁移；双荧光素酶报告基因实验验证circSETDB1与miR-345-5p的靶向关系。结果 与癌旁组织相比，肝癌组织中circSETDB1 mRNA表达升高（P<0.05），miR-345-5p mRNA表达降低（P<0.05）。与对照组相比，蜂斗菜素各剂量组HepG2细胞的细胞活性、集落形成数降低（P<0.05），细胞凋亡率和Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高（P<0.05），且呈剂量依赖性（P<0.05）。与si-NC组相比，si-circSETDB1组HepG2细胞的circSETDB1表达、细胞活性、集落形成数、迁移细胞数和划痕愈合率降低（P<0.05），miR-345-5p表达、细胞凋亡率和Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高（P<0.05）。与蜂斗菜素组相比，蜂斗菜素+pcDNA-circSETDB1组HepG2细胞中circSETDB1表达、细胞活性、集落形成数、迁移细胞数和划痕愈合率升高（P<0.05），miR-345-5p表达、细胞凋亡率和Cleaved-Caspase-3蛋白表达降低（P<0.05）。结论 蜂斗菜素可抑制肝癌细胞HepG2增殖和迁移，并诱导细胞凋亡，其机制可能与抑制circSETDB1表达而上调miR-345-5p表达有关。